手术室（英文：operating room，簡稱：OR），又稱開刀房，指医院中提供无菌环境以实施手術的場所。進入手術室，需要穿著手術服、口罩、髮帽、鞋套或手術室專用鞋；刷手護理師、主刀醫師、外科助手，還需要進行刷手並穿著無菌手術衣。
手术室设施
手术室通常至少包含以下设施：
手術室人員
手術室的人員分為手術團隊與麻醉團隊。
手術團隊
主刀醫師：負責動刀。外科助手：可以是護理師也可以是醫師，協助主刀醫師動刀。刷手護理師：給予主刀醫師、外科助手需要的器械和計數器械。
麻醉團隊
麻醉醫師：負責插管、麻醉、給予藥物和監控生命徵象。麻醉護理師：協助麻醉醫師。
其他
流動護理師：給予刷手護理師需要的器械、計數器械和手術團隊與麻醉團隊的聯繫。