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精液冷凍貯藏
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精液冷凍貯藏

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精液冷凍貯藏(Semen cryopreservation)是指以低溫保存精子細胞活性的程序。精液可以透過深低溫保存永久保存。若考慮以人類精液進行冷凍貯藏,之後又成功受孕的案例,據文獻記載貯藏最長達24年。精液冷凍貯藏可以用在捐精精子銀行),可能捐精者和需要精子者相距距離較遠,或是在捐精後一段時間才需要精子,若男性接受输精管切除术或是像化学疗法放射線療法等會影響生育能力的手術前,也可能會先將精液冷凍貯藏,保留日後再養育後代的可能性。在1954年時就已有用冷凍精液解凍後成功受孕的例子。

精液冷凍儲藏技術廣泛應用於男性不孕症患者,及畜牧業的人工繁殖上。對於即將進行化學治療等細胞毒殺治療的患者,該技術也能事先保存患者的生殖能力。

保存方法

冷凍

最常用的精液冷凍保護劑甘油(佔冷凍保護劑溶液的10%),而甘油溶液中也常加入蔗糖、其他的雙醣三醣。冷凍保護劑溶液會加入蛋黄或大豆卵磷脂,比較使用這兩種物質,精液在解凍後,在精子活動力、變形程度、在體外和玻尿酸盐結合的能力以及其DNA的完整性上,兩者沒有顯著的差異。

冷凍保護劑中的其他成份可以增加精子在冷凍後的存活率及受孕率。在冷凍貯藏前,用肝素結合蛋白來處理精子,可以減少精子的冷凍傷害,也減少自由基(Reactive oxygen species)的生成。在冷凍保護劑中加入神經成長因子可以減少精子的死亡速率,增加精子解凍後的活動力。若在冷凍前,用環糊精將膽固醇摻入精子細胞膜中,也可以增加精子活動力。

精液的冷凍會用控制速率的慢速冷卻(深低溫保存,簡稱SPF),另一種冷卻方式是較新式的快速冷卻,稱為玻璃化(vitrification)。玻璃化的解凍後活動力以及冷凍存活比例都比慢速深低溫保存要高。

解凍

最理想的解凍溫度是40 °C,不過解凍溫度的細微調整對精子活動力、頂體狀態、ATP含量以及DNA完整性的影響不大。精液冷凍後的解凍也有許多不同的技術,在Di Santo等人2012年的文獻中都有提到。

再冷凍

比較冷凍再解凍一次和三次的精液,在DNA片段化的風險差異不大。前提是精液和其原始的冷凍保護劑一起再冷凍,中間沒有經過精子洗滌或其他類似程序,而用來進行人工受精前,會先用密度梯度離心swim-up進行分離。

對於精子品質的影響

有些證據證實精子在冷凍後,單股斷裂、DNA縮合片段化的比例增加,這也會增加後代DNA突變的風險。使用抗氧化剂以及良好的冷凍控溫可能可以改善此情形。

在長期的追蹤研究中,用冷凍後精液受孕的人和一般人比較,其先天性障碍染色体畸变的比例相近,還沒有證據支持用冷凍後精液受孕的人有較高的風險。

歷史

對於精液冷凍儲藏的歷史能夠追溯到1776年,義大利人拉扎羅·斯帕蘭札尼嘗試使用冰雪保存精子。1949年克利斯朵夫·波尔吉利用甘油冷凍保護的特性,大幅改善了精液保存技術。自此,人們開始成功以冷凍儲藏的精液,進行各種物種的人工受精。

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參考資料


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